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착상 전 돼지 수정란의 효율적인 초급속 동결 방법 개발에 관한 연구 / 정학준

14 재생산 기술 조회 수 228 추천 수 0 2017.02.03 14:51:05
nibp *.223.3.98
발행년 : 2016 
구분 : 학위논문 
학술지명 : 학위논문(석사)-- 대구대학교 : 생명공학과 생명공학 2016. 2 
관련링크 : http://www.riss.kr/link?id=T14002622 

착상 전 돼지 수정란의 효율적인 초급속 동결 방법 개발에 관한 연구

= Development of Effective Vitrification Method of Porcine Preimplantation Embryos

                                          

  • 저자

    정학준                                       

  • 형태사항

    ⅴ,25 ; 26 cm

  • 일반주기

    지도교수: 구덕본

  • 학위논문사항

    학위논문(석사)-- 대구대학교 : 생명공학과 생명공학 2016. 2

  • 발행국

    경상북도

  • 언어

    한국어

  • 출판년

    2015

초록 (Abstract)

  • 동결보존은 많은 포유동물 종에서 성공적으로 적용하여 사용되어 지고 있다. 그럼에도 불구하고 돼지 배아는 온도에 매우 민감하여 동결/융해 시 발달 능력이 감소되는 것으로 나타나고 있...
  • 동결보존은 많은 포유동물 종에서 성공적으로 적용하여 사용되어 지고 있다. 그럼에도 불구하고 돼지 배아는 온도에 매우 민감하여 동결/융해 시 발달 능력이 감소되는 것으로 나타나고 있다. 본 연구의 목적은 돼지 배아의 유리화 동결/융해 후 생존 능력을 평가하고자 한다. 돼지의 배반포는 인위적인 blastocoele의 탈수(FBC)와 비 인위적 탈수 방법으로 유리화 냉동하였고, 부수적으로 배양액에 fetal bovine serum(FBS)을 첨가하거나 첨가하지 않은 상태로 배양을 실시하였다. 유리화 동결/융해된 돼지 배반포는 각각 group A; non-FBC와 non-FBS, group B; non-FBC와 FBS, group C; FBC와 non-FBS, group D; FBC와 FBS 군으로 나누어 연구를 실시하였다. 초급속 동결/융해된 돼지 배반포의 각각의 군에서 생존율은 39.5, 52.5, 54.8 및 66.7%로 나타났다(p<0.05). 생존한 배반포의 reactive oxygen species(ROS) level은 다른 group과 비교하였을 때 group D에서 유의하게 낮게 나타났다(p<0.05). 게다가 total cell 수 역시 group D에서 유의하게 높게 나타났다(p<0.05). 그 외에도 group D에서 세포사멸 세포의 수가 유의하게 적은 것으로 나타났다(2.0±1.5 vs 3.2±2.1, 2.8±1.9, 2.7±1.6, p<0.05). 이 결과는 FBC/FBS방법이 유리화 동결/융해 과정에서 ROS와 세포사멸지수의 세포내 수준을 조절함으로써 유리화 동결된 배반포의 발달능력을 향상시키는 것으로 판단된다. 따라서 본 연구는 FBC/FBS방법이 돼지 배반포의 유리화동결/융해과정에 효과적인 처리 방법임을 제시한다.

목차 (Table of Contents)

  • Ⅰ. INTRODUCTION 1
  • Ⅱ. MATERIALS AND METHODS 3
  • 1. Chemicals 3
  • 2. In vitro production of porcine embryos 3
  • 3. FBC of blastocysts cavity 4
  • 4. Vitrification procedure 5
  • 5. TUNEL assay 6
  • 6. Measurement of ROS levels 6
  • 7. Statistical analysis 7
  • Ⅲ. RESULTS 8
  • 1. FBC/FBS enhances the rates of survival in cryopreserved expanded porcine blastocysts 8
  • 2. Total cell numbers and apoptosis in blastocysts derived from group A-D of cryopreserved porcine expanded blastocysts.. 8
  • 3. Effects of FBC/FBS treatment on expression levels of ROS in cryopreserved porcine expanded blastocysts 8
  • Ⅳ. DISCUSSION 17
  • REFERENCES 20
  • ABSTRACT 24
  • ACKNOWLEDGEMENT 25
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