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글 수 4,668
| 발행년 : | 2011 |
|---|---|
| 구분 : | 학위논문 |
| 학술지명 : | |
| 관련링크 : | http://www.riss.kr/link?id=T12293239 |
인간 tyrosine hydroxylase 유전자의 조절 기작 = Study on the regulation of human Tyrosine hydroxylase promoter
- 저자
권정준
- 형태사항
; 26cm
- 일반주기
지도교수:설원기
- 학위논문사항
학위논문(석사)-- 인제대학교 대학원 : 뇌과학협동과정 2011. 2
- 발행국
경상남도
- 언어
한국어
- 출판년
2011
- 초록 (Abstract)
- Tyrosine hydroxylase는 catecholamine 생합성회로의 첫 합성 효소이며 rate-limiting step 효소이다. 즉, Tyrosine hydroxylase (이하 TH라 함) 효소의 양이 증가하면 세포에서 합성되는 도파민의 양도 증가한다. TH의 발현이나 활성 조절기작은 다음 두 가지 이유 때문에 연구가 집중되어 왔다. 첫째, 도파민의 세포내 농도의 감소는 도파민성 신경세포의 사멸로 생기는 파킨슨병의 주요 증상 중의 하나이기 때문이다. 둘째는, 환자에게서 도파민의 농도를 증가시키는 방법이 파킨슨병 환자의 증상을 완화시킬 수 있으리라는 기대 때문에 TH의 전사 단계에서의 조절 기작은 상당히 활발하게 연구되어 왔다. 먼저 TH 유전자의 발현 연구를 위해 rat TH promoter가 사용되어 cAMP, butyrate, valproic acid, glucocorticoid 등의 다양한 chemical들을 처리하거나 Ptx3와 HIF2alpha 유전자의 발현에 의해 rat TH의 발현의 활성화가 알려졌다. 이에 반해 human TH promoter에 관한 연구는 2003년에 두 개의 논문이 발표되었으나 human TH 유전자의 활성화 조절 기작에 관한 연구발표는 미미한 것이 현실이다. 파킨슨병의 연구를 위해서는 rat TH 유전자의 발현 조절 기작에 관한 연구 보다는 human TH 유전자에 관한 연구가 중요하기 때문에 rat TH 유전자의 발현을 활성화 시키는 것으로 알려진 chemical들인 cAMP, butyrate, valproic acid, glucocorticoid를 처리하거나 Ptx3 또는 HIF2alpha 유전자를 발현시켜 human TH 유전자의 발현에는 어떠한 영향을 주는지 reporter assay와 western analysis를 통하여 분석하였다. 분석결과에서 human TH 유전자는 rat TH 유전자의 다른 활성인자들과는 달리 rat TH 유전자 내부의 cAMP-response element에 의존적으로 TH의 발현을 활성화 시키는 것으로 보고 되어 있는 butyrate와 valproic acid에 의해서만 일관된 발현 활성화가 관찰되었다. 이러한 결과는 이미 보고 되어 있는 rat TH 유전자의 활성화 인자들이 human TH 유전자의 발현에는 다른 조절 기작으로 작용한다는 사실을 말해주는 것이며 human TH 유전자의 발현 조절에 관한 심층적인 연구가 필요함을 시사해 주는 것이다.
- 목차 (Table of Contents)
- Ⅰ. 서론 1
- 1. 파킨슨병 1
- 2. 파킨슨병 치료의 한계 1
- 3. Tysoine hydroxylase 연구의 의의 1
- 4. Tysoine hydroxylase 연구 사례 2
- Ⅱ. 연구목적 6
- Ⅲ. 연구재료 및 방법 7
- 1. 관련 유전자및 chemical들의 확보 7
- 2. Cell culture and transfection 7
- 3. Western analysis와 antbodies 7
- 4. Luciferase assay 8
- Ⅳ. 연구결과 9
- 1. TH positive cell line들의 TH 단백질 발현 양의 확인 9
- 2. cAMP에 의한 TH의 발현 활성화 10
- 2.1. Rat TH의 발현 활성화 western analysis 10
- 2.2. Rat TH promoter의 luciferase assay 11
- 2.3. Human TH promoter의 luciferase assay 12
- 3. Dexmethasone (synthetic glucocorticoid)에 의한 TH의 발현 활성화 13
- 3.1. Rat TH의 발현 활성화 western analysis 13
- 3.2. Rat TH promoter의 luciferase assay 14
- 3.3. Human TH promoter의 luciferase assay 15
- 4. Sodium butyrate와 valproic acid에 의한 TH의 발현 활성화 16
- 4.1. Rat TH의 발현 활성화 western analysis 16
- 4.2. Rat TH promoter의 luciferase assay 17
- 4.3. Human TH promoter의 luciferase assay 18
- 4.4. Human TH의 발현 활성화에 관한 butyrate-response element와 cyclic AMP-response element의 관계 확인 19
- 5. HIF2α와 PTX3에 의한 rat TH의 발현 활성화 20
- 6. 그 외 다른 rat TH의 발현 활성화 인자들의 human TH의 발현 활성화 확인 21
- Ⅴ. 결론 및 고찰 22
- 참고문헌 24
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