난포의 크기와 난황의 첨가가 초자화동결소 미성숙난포란의 생존성에 미치는 영향
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초록 (Abstract)- 본 연구는 미성숙 소 난포란의 초자화동결법에서 채란난포의 크기(직경 <3mm와 ≥3mm)와 동결보호제(ethylene glycol, ES 30%와 40%; 난황, EY 0과 10%)의 농도가 동결-융해 후 미성숙 난포란의 생존성...
- 본 연구는 미성숙 소 난포란의 초자화동결법에서 채란난포의 크기(직경 <3mm와 ≥3mm)와 동결보호제(ethylene glycol, ES 30%와 40%; 난황, EY 0과 10%)의 농도가 동결-융해 후 미성숙 난포란의 생존성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시되었으며 생존성은 동결-융해 후 난자의 형태검사와 체외성숙율 및 체외수정율로서 평가하였다.
본 실험에서 얻어진 결과는 다음과 같다.
1. 3mm미만의 난포란에서는 동결-융해 후 정상 형태의 생존 난자가 EG30%+EY10%에서 66.2%, EG40%에서는 난황첨가 유무와 관계없이 50.0%~65.2% 범위였으며 FDA염색에 의한 생존율은 EG40%+EY10%에서 65.5%로 가장 높았으며 EG30% 난황 무첨가구(37.3%)에서 가장 낮았다(P<0.05).
2. 3mm이상의 난포란은 동결-융해 후 정상형태의 생존 난자가 처리구간에 큰 차이 없이 57.5~67.5%였으며 FDA염색 결과 EG30%에서는 EY첨가 효과가 없었으나 EG40%에서는 EY 무첨가보다 10%첨가시 생존율이 유의적으로 향상되었다(42.9% 56.6%).
3. 3mm미만 난포란의 융해 후 체외성숙율은 21.4~27.6%로서 비동결 난자의 58.3%보다 월등히 낮았으며(P<0.05) EG과 EY의 첨가수준간에 체외성숙율에 대한 유의차는 나타나지 않았다.
4. 3mm이상 난포란의 체외성숙율은 EG40%+EY10%에서 54.4%로서 다른 첨가구보다 월등히 높았으나 비동결 난포란의 80.3%보다는 현저히 낮았다(P<0.05).
5. 3mm미만 난포란의 융해 후 체외수정율은 11.1~20.3%로서 EG와 EY 첨가 수준간에 차이는 나타나지 않았으며 모두 비동결 난포란의 56.7%보다는 유의적으로 낮았다(P<0.05).
6. 3mm이상 난포란의 융해 후 체외수정율은 EG40%+EY10% 처리구에서 39.7%로서 다른 처리구보다 월등히 높았다(P<0.05). 그러나 비동결 난포란의 77.5%보다는 현저히 낮았다.
결론적으로 미성숙 난포란의 동결-융해 후 생존성은 채란난포의 크기에 영향을 받지 않았으며 동결보호제(EG)에 10%난황첨가로 생존성이 크게 향상됨을 알 수 있었다. 한편 동결난자의 체외성숙율과 체외수정율에 있어서는 3mm미만 난포란의 경우 난황첨가 효과가 없었으나 3mm이상 난포란에서는 EG40%+EY10%에서 가장 양호한 결과를 얻을 수 있었다.
목차 (Table of Contents)- I. 서론 1
- Ⅱ. 연구사 3
- Ⅲ. 재료및방법 8
- 1.미성숙 소 난포란의 채란 8
- 2.미성숙 소 난포란의 동결보존 및 융해. 8
- 1) 동결보존액 및 융해액의 제조 8
- 2) 난황액의 제조 8
- 3) 동결보존액의 첨가 및 동결 9
- 4) 동결 난자의 융해 9
- 3. 체외성숙 배지의 제조 및 체외성숙 9
- 4. 동결-융해 난포란의 생존성 판정. 10
- 1) 형태학적 판정 10
- 2) FDA test 10
- 5. 동결-융해 난포란의 성숙율 판정 11
- 6. 동결-융해 난포란의 체외수정 11
- 7. 체외수정 여부의 판정 11
- 8.통계처리 방법 12
- Ⅳ 결과 및 고찰 13
- 1. 난포 크기, 동결보호제 농도 및 난황 첨가에 따른 동결 난포란의 생존성 13
- 2. 난포 크기, 동결보호제 농도 및 난황 첨가에 따른 동결 난포란의 체외성숙율 17
- 3. 난포 크기, 동결보호제 농도 및 난황 첨가에 따른 동결 난포란의 체외수정율 21
- Ⅴ. 적요 25
- Ⅵ. 인용문헌 27